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    如何正确操作使用355618BECKMAN超速离心管?

    点击次数:574 发布时间:2021-09-05
      355618BECKMAN超速离心管的灭菌是用10%的过氧化氢浸泡,福尔马林也适合所有的离心管但不太安全。70%的乙醇适用于PA和PP和PET管,水沸灭菌适合PA和PP管。环氧乙烷适合PC管。高温高压灭菌法,115℃、30min适合PA、PP和PC材料的离心管,但是PC材料的使用寿命将受限制;121℃、20min适合PA和PP管,126℃、15min均不适合任何离心管。此外,离心管在紫外下无法灭菌。
     
      355618BECKMAN超速离心管操作中需要注意如下问题:
     
      (1)建议使用幼嫩的材料,材料含水量大时,可用70%乙醇擦拭,蒸馏水稍冲洗后用滤纸吸干,于液氮中研磨。如果材料量大(20g以上),或所用的植物材料较老,或材料含有较多的酚类物质,应提高β-巯基乙醇的用量。
     
      (2)氯仿抽提时,要保证抽提液中有一定的盐浓度,否则DNA进入沉淀。
     
      (3)CTAB溶液在15℃以下会沉淀,因此离心和其他操作时不可在低温下进行。
     
      (4)加入沉淀缓冲液应在高于15℃的室温下沉淀,如果室温适宜,沉淀时间足够而无沉淀出现,可能是盐浓度高,这时可再加入沉淀缓冲液降低盐浓度。离心收集CTAB沉淀缓冲液沉淀的DNA时,不能离心过度,高速度及长时间的离心都会使沉淀过紧,而再溶解困难。
     
      (5)采用真空抽干沉淀时,不能抽得太干抽得太干会使DNA断裂,也可不采用真空抽干,将离心管置通风柜或超净工作台中令乙醇自然蒸干,这样对DNA造成的损伤小。
     
      (6)10%的CTAB溶液很粘滞,取液时可将其加热至56℃。
     
      (7)转移DNA溶液用的枪头要剪去尖,避免对DNA的机械损伤。
     
      (8)所得DNA应为白色或灰白色,若呈褐色则有多酚物质污染。对于含多酚类物质多的材料,提取缓冲液中可加入1%的PVP。对于多糖含量高的材料,提取液中CTAB的浓度可增至3%或更高。
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